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第一节 病毒性肝炎病原学指标测定(2 / 2)

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ELISA法:阴性。

抗HBc-IgM是感染HBV后,血中最早出现的特异性抗体。急性期滴度升高,是诊断急性乙肝、判断病毒复制活跃及具有强传染性的指标;另外抗HBc-IgM阳性还见于慢活肝。抗HBc-IgG在感染HBV后Im左右开始升高,临床上测定总抗-HBc主要反映的 是抗HBc-IgG水平,高滴度表明HBV正在感染与复制;低滴度则表明既往感染,体内持续时间长,具有流行病学意义。

参见抗HAV抗体测定中ELISA法,此外由于抗HBc-IgM的检测受类风湿因子影响较大,低滴度抗HBc-IgM时,应注意鉴别是为假阳性。

HBV前S1(Pre-S1)和抗前S1(anti-Pre-S1)抗体

Pre-S1是HBV外膜蛋白成分,通常连接在Pre-Sz蛋白的氨基末端,Pre-Si第21~47位氨基酸为肝细胞膜受体.HBV可通过此受体黏附于肝细胞膜上,而进入肝细胞。Pre-Si抗原性较强,可刺激机体产生抗Pre-Si抗体。

ELISA法:阴性。

参见抗HAV抗体测定中ELISA法。

Pre-S1阳性提示病毒复制活跃,具有较强传染性;抗Pre-S1抗体是HBV的中和抗体,机体较早出现表示预后良好。抗Pre-S1抗体阳性见于急性乙肝恢复期,提示HBV正在或已被清除。

HBV前S2(Pre-S2)和抗前S2抗体(anti-Pre-S2)

Pre-S2是HBV外膜蛋白成分,其C末端直接与HBsAg的N末端相连,Pre-S2N端109~133位氨基酸为聚合人血清白蛋白受体,可与聚合人血清白蛋白结合。人肝细胞膜上也有聚合人血清白蛋白受体,因此HBV可通过病毒受体一聚合人血清白蛋白一肝细胞膜受体黏附于肝细胞膜,成为HBV侵入肝细胞的主要结构组分之一。 Pre-S2蛋白抗原性较强,刺激机体可产生抗Pre-S2抗体。

ELISA法:阴性。

Pre-S2阳性提示病毒复制活跃,具有传染性;抗Pre-S2抗体是HBV的中和抗体,阳性时表示病情好转,较早出现是预后良好的指标,特别是对于急性乙肝的预后有重要意义。

参见抗HAV抗体测定中ELISA法。

血清HBV-DNA荧光定量PCR测定

荧光定量PCR法:<l.Ox103拷贝/ml。

血清HBV-DNA检测结果与乙肝五项指标的关系:

1.HBV-DNA与HBsAg 一般HBsAg阳性时,HBV-DNA常阳性;但在HBsAg含量极低采用ELISA法检测不出时,可能会出现HBsAg阴性而HBV-DNA阳性的情况;或是患者正处于HBV感染早期,机体乙肝五项标志物尚未产生,但由于PCR检测具有极高的灵敏度,HBV-DNA含量很低也可检出。

2.HBV-DNA与抗-HBs HBV感染恢复期抗-HBs呈阳性,血清HBV-DNA -般为阴性,但少数患者特别是在肝组织HBV-DNA含量很高时,也可为阳性,提示体内HBV尚未完全被清除。

3.HBV-DNA与HBeAg、抗-HBe、抗-HBc HBeAg阳性时HBV-DNA几近全部为阳性;HBeAg阴性、抗-HBe和抗—HBc阳性时,说明HBV复制减弱,其HBV-DNA阳性检出率仍可高达80%,患者具有传染性。

除此之外还用于乙肝患者抗病毒药物的疗效观察、献血员筛查、血液制品及乙肝疫苗安全性评价。

PCR技术灵敏度很高,可由于实验操作不当、实验室设置不规范、消毒处理不彻底、标本收集不符合要求等造成污染,致使结果 出现假阳性。因此必须严格按照PCR实验室要求进行操作,采血使用一次性试管,标本室温放置不能超过6h,所用物品必须高压灭菌等。血清HBV-DNA测定是评价HBV感染和复制最直接、最灵敏、最特异的指标,也是观察乙肝患者有无传染性最可靠的方法。

抗丙型肝炎抗体(anti-hepatitis C virus,anti-HC)

丙型肝炎病毒(hepatitis C virus,HCV)属于黄病毒科丙型肝炎病毒属,是一种直径为30~60nm的球形颗粒,外有脂质外壳、囊膜和棘突结构,内有由核心蛋白和核酸组成的核衣壳。

ELISA法:阴性。

抗HCV分为抗HCV-IgM和抗HCV-IgG,均为非保护性抗体,目前临床上检测的为总抗体,抗HCV阳性即是HCV感染的重要标志。抗HCV-IgM阳性见于急性HCV感染,一般持续1—3m,是诊断HCV早期感染、病毒复制和传染性的指标,若持续阳性则提示病情易转为慢性;抗HCV-IgG出现晚于抗HCV-IgM,抗HCV-IgG阳性表示体内有HCV感染,但不能作为早期诊断指标,低滴度抗HCV-IgG提示病毒处于静止状态,高滴度提示病毒复制活跃。

抗HCV-IgM的检测影响因素较多,如球蛋白、类风湿因子等,稳定性不如抗HCV-IgG。

丁型肝炎病毒抗原测定(hepatitis D virus antigen.HDVAg)和丁型肝炎病毒抗体测定(hepatitis D virus antibody,anti-HDV)

HDV是一种缺陷的单股负链RNA病毒,呈球形,其复制需依赖于HBV的存在,包括以HBsAg作为外壳,核心为HDVAg和HDV-RNA,只有与HBV共存才能感染患者。HDVAg是HDV唯一 的抗原成分,因此仅一个血清型,刺激机体所产生的抗HDV不是保护性抗体。临床诊断HDV感染主要依据为血清HDAg、抗HDV-IgM、抗HDV-IgG测定。

ELISA法:阴性。

参见抗HAV抗体测定中ELISA法。

HDVAg:HDV急性感染早期出现,但很快下降,一般1~2w即难以检测到;慢性感染患者血清中HDVAg可持续阳性。短期内阴转预后较好,持续阳性表示肝损害严重,预后欠佳。

抗HDV-IgM:抗HDV-IgM出现较早,但持续时间较短,用于急性感染早期诊断;抗HDV-IgG:只能在HBsAg阳性患者中检出,是诊断慢性HDV感染的可靠指标,急性期时滴度低,慢性感染滴度高,且HDV被清除后仍可持续多年。重叠感染HBV和HDV时,常表现为抗HBc-IgM阴性、抗HDVlgM和抗HBclgG阳性,提示患者可能发展为肝硬化,且进展快。

戊型肝炎病毒抗体测定(anti-hepatitis E virus,anti-HEV) HEV是引起肠道传播的戊型肝炎之病原体,传播方式及临床表现与甲肝相似,主要流行于亚洲、非洲、墨西哥等国家和地区,常通过饮用被污染的水源而导致戊肝暴发流行,散发病例分布于世界各地。

HEV为20面对称体球形颗粒,直径27~34nm,是一种无包膜RNA病毒,在核苷酸和氨基酸水平高度同源性的基础上,具大鼠等动物中分离到HEV样病毒,提示HEV为人畜共患疾病。

ELISA法:阴性。

急性期患者血清中可检出抗HEV-IgM,持续2~3m;恢复期可检出抗HEV-IgG,持续约1y,提示戊肝病后免疫不能持久。戊肝为自限性疾病,一般不会转为慢性,但一部分患者,尤其是妊娠期若合并戊肝时,易发展为重症肝炎,可导致流产或死亡,病死率高达20%—30%。HBV感染者重叠感染HEV也易发展为重症肝炎。

参见抗HAV抗体测定中ELISA法

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